【干貨分享】第二期:顏色補償那些事兒
多重熒光PCR已經(jīng)廣泛地使用在各種病原體的檢測中,這得益于熒光PCR檢測儀多通道熒光采集的功能。
2022-01-20
多重熒光PCR已經(jīng)廣泛地使用在各種病原體的檢測中,這得益于熒光PCR檢測儀多通道熒光采集的功能。在使用羅氏480(LC1/LC2/Z cobas)進(jìn)行多重檢測時(shí),往往會(huì )遇到需要做顏色補償的情況,那么今天小編就與您聊一聊關(guān)于顏色補償的那些事兒~
為什么羅氏480需要做顏色補償?
LightCycler2的濾光片:
熒光通道發(fā)射光譜拋物線(xiàn)示意圖:
由于每臺儀器的濾光片是固定的,無(wú)法改變其激發(fā)光與檢測光波長(cháng);想要校正這種溢出,在運行這個(gè)實(shí)驗或分析這個(gè)數據時(shí),就需要應用顏色補償目標。當用顏色補償目標時(shí),LightCycler 算法會(huì )使用補償實(shí)驗文件中的數據來(lái)補償熒光值的溢出,補償后即可以看到每個(gè)通道特定的信號。
如何使用顏色補償?
B. 選擇In Database
C. 選擇補償實(shí)驗數據
補償前
補償后
從補償前后結果來(lái)看,即可確定VIC通道中的翹尾,是ROX通道串孔所致。羅氏480分析界面調用補償文件的方法也是一鍵操作,十分簡(jiǎn)便。針對一個(gè)廠(chǎng)家的試劑,顏色補償實(shí)驗只需做一次,數據便可一直使用。