【干貨分享】第四期:PCR結果分析,自動(dòng)基線(xiàn)也別用啦
基線(xiàn)是指在PCR擴增反應的最初數個(gè)循環(huán)里,熒光信號變化不大,接近一條直線(xiàn),即所謂的基線(xiàn)(如圖1)。



情況一:你是否也遇到過(guò)這樣擴增曲線(xiàn),如圖3所示,機器自動(dòng)基線(xiàn)設置的太寬,就會(huì )導致基線(xiàn)下傾的現象。
圖 3
導致這種現象的主要原因就是機器自動(dòng)基線(xiàn)設置的太寬導致的,標本在15個(gè)循環(huán)之前就進(jìn)入指數增長(cháng)期,而機器自動(dòng)基線(xiàn)固定的把指數增長(cháng)期作為基線(xiàn),就導致此種曲線(xiàn)的出現,只需手動(dòng)把基線(xiàn)起始循環(huán)數調整為指數增長(cháng)期之前即可,比如將此數據的起止循環(huán)數調整為3-8個(gè)循環(huán)數后,擴增曲線(xiàn)就恢復正常了,如圖4所示:

圖 4
圖 5
圖 6
情況三:實(shí)驗中常見(jiàn)的氣泡干擾實(shí)驗結果分析,如圖7所示:
圖 7
此時(shí)調節閾值線(xiàn),會(huì )更容易判斷閾值線(xiàn)應該處于什么位置(可以參考上一篇干貨——調節閾值線(xiàn)),從而得到更準確的Ct值。


上海伯杰醫療科技有限公司是一家致力于感染性病原體分子診斷試劑研發(fā)和應用,深耕于多重熒光 PCR 診斷試劑和痕量病毒二代測序試劑及相關(guān)服務(wù)的國家高新技術(shù)企業(yè)。公司圍繞感染性病原體這一主線(xiàn),從診斷試劑、診斷儀器、測序服務(wù)和醫檢所服務(wù)等多個(gè)面提供全套解決方案。公司秉承“勇于創(chuàng )新,質(zhì)量為先”的方針,為醫療機構、疾控公衛、高??蒲械群献骰锇樘峁﹥?yōu)質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)。

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